Como una de las posibles medidas de manejo de aplicación práctica para la reducción de inóculo de Spongospora subterranea f. sp. subterranea en suelos infestados con quistosoros del patógeno, se evaluó la incidencia de su infección en diferentes plantas hospederas durante tres siembras consecutivas. Las siembras se realizaron en macetas que contenían 2 kg de suelo previamente inoculados con una concentración de 1x105 quistosoros.g-1 de suelo; las cosechas de las plantas se realizaron cada tres meses, seleccionando dos muestras de raíz por maceta, una para observación de estructuras del patógeno por microscopía de luz, previa tinción con azul de tripano al 0,05% y otra para detección molecular mediante PCR en tiempo real (qPCR). Para el análisis estadístico se evaluaron los modelos Exponencial y Monomolecular, con el objetivo de seleccionar el que mejor se ajustara a los datos obtenidos. Según el valor estimado para la incidencia de estructuras del patógeno en las raíces, en las especies Cyphomandra betacea, Physalis peruvianum, Solanum nigrum, Allium cepa, Solanum quitoense y Rumex crispus, se reduce la presencia de quistosoros y zoosporangios después de tres siembras consecutivas en condiciones de casa de malla, mientras que en las especies Petroselinum crispum, Pennisetum clandestinum, Zea mays y Solanum lycopersicum se aumenta la incidencia de estructuras de S. subterranea f. sp. subterranea en las raíces.

Trap crops have been considered an alternative strategy to reduce the inoculum of soil pathogens such as Spongospora subterranea f.sp. subterranea. In this work, the incidence of this pathogen was evaluated at three consecutive sowings using different alternative hosts. Plants were sown in pots containing 2 kg of soil inoculated with 1x105 cystosori per gram and harvested every three months. Roots were tested for the presence of cystosori and zoosporangia using light microscopy observations with trypan blue (0.05%) and Real-time PCR (qPCR). Data fitting was performed using Exponential and monomolecular models. According to the estimated incidence values of pathogen structures, plant species Cyphomandra betacea, Physalis peruvianum, Solanum nigrum, Allium cepa, Solanum quitoense and Rumex crispus, significantly reduced the amount of cystosori and zoosporangia after the three consecutive sowings. In contrast, Petroselinum crispum, Pennisetum clandestinum, Zea mays and Solanum lycopersicum increased the incidence of S. subterranea f. sp. subterranea.

El agente causal de la sarna polvosa de la papa, Spongospora subterranea f. sp. subetrranea es una de las enfermedades más limitantes de la producción del cultivo a nivel mundial. En Colombia, viene incrementando su incidencia al punto de disminuir la producción, sin llegar a encontrar métodos de control efectivos. En este estudio, se buscó establecer un rango de hospederos del patógeno a partir de inoculaciones por bioensayos. Así, plantas de 33 especies se inocularon en solución a una concentración de 1x10(6) quistosoros mL-1 durante 12 días; posteriormente, las plantas fueron sembradas en campo, realizando evaluaciones a los 15, 30, 60, 90 y 120 días después de inoculadas. En cada evaluación se seleccionaron diez plantas de cada especie, con el fin de hacer tinción de raíces e identificar al microscopio estructuras asociadas al patógeno. A partir de la identificación morfológica fue posible clasificar las especies como plantas trampa quienes sólo presentaron zoosporangios, hospedero Tipo I con presencia sólo de quistosoros y hospederos Tipo II quienes presentaron estructuras de zoosporangios y quistosoros. Algunos de éstos hospederos pertenecen a las familias Alliaceae, Apiaceae, Brassicaceae, Poaceae, Polygonaceae, Solanaceae, ampliándose así el rango de especies que pueden ser reportadas como hospederas de Spongospora subterranea f. sp. subterranea en Colombia.

Potato powdery scab, caused by Spongospora subterranea f. sp. subetrranea, is a disease that limits worldwide potato crop production. Incidence of the disease has been increasing in Colombia, thereby affecting tubers production, so far effective control methods have yet to be developed. The aim of this research was to establish the host range plants for Spongospora subterranea f. sp. subterranea by artificial inoculations. Thus, 33 species were inoculated with 1×10(6) sporosori.mL-1 solution for 12 days. The plants were then planted in field, evaluations were performed at 15, 30, 60, 90 and 120 days after inoculation, 10 plants of each species were selected for every evaluation, the roots were stained and the pathogenic structures were identified by microscopy. Morphological examination enabled the identification of trap plants species, which presented zoosporangia only; Type I hosts, which present sporosori only; and Type II hosts, which presented both sporosori and zoosporangia. Some of these hosts belonged to the Alliaceae, Apiaceae, Brassicaceae, Poaceae, Polygonaceae and Solanaceae families, thus extending the species range that can be reported as hosts of Spongospora subterranea f. sp. subterranea in Colombia.

Potato powdery scab is caused by Spongospora subterranea f. sp. subterranea, an obligate parasite and soil-borne pathogen which affects the root system and tubers. It is also a vector of the pomovirus Potato mop-top virus (PMTV). This organism has resistance structures called cystosori which allows it to remain in the soil for years. This study aimed to determine the optimal conditions of temperature, inoculum sources and substrate for zoospore release, for future use in infectivity assays. Three experiments were conducted in which three inoculum sources (soil, roots and tubers), three liquid substrates (water, root extract and nutrient solution) and different temperatures were tested. Observations of mobile zoospores were made in a light microscope equipped with a Neubauer chamber, from 24 until 120 hours after inoculation. Significant differences were found among the different treatments, with the optimal conditions using root extract as inoculum source, temperature between 15 and 20°C, from 24 until 96 hours after inoculation.

La sarna polvosa de la papa es causada por Spongospora subterranea f. sp. subterranea, parasito obligado y patógeno del suelo, que afecta el sistema radicular y tubérculos de papa. Igualmente es vector del pomovirus Potato mop-top virus (PMTV). Este organismo posee quistosoros como estructuras de resistencia las cuales le confieren la posibilidad de permanecer en el suelo por años. Este estudio busca determinar bajo que condiciones de temperatura, fuentes de inóculo y sustratos se obtiene una máxima liberación de zoosporas con el fin de utilizar esta metodología en pruebas de infección de S. subterranea. Así se realizaron tres ensayos donde se evaluaron tres fuentes de inóculo (suelo, raíz, tubérculo), tres medios líquidos (agua, extracto de raíz y solución nutritiva) y diferentes temperaturas. Las observaciones fueron realizadas en microscopio con cámara de Neubauer por conteo de zoosporas móviles, con lecturas en el tiempo a partir de las 24 hasta las 120 horas. Se encontró como resultado diferencias significativas en los sustratos empleados para liberación manifestándose mayor liberación de zoosporas en extracto de raíz en temperatura fluctuante de 20-15°C a partir de las 24 horas de inoculación hasta las 96 horas.

El tomate de árbol es uno de los principales frutales cultivados en la región andina de Colombia. Durante los últimos años las áreas dedicadas a su plantación se han reducido drásticamente, debido entre otras razones, al efecto detrimental de la enfermedad conocida como Virosis. A pesar de la importancia económica de esta enfermedad, el nivel de conocimiento que se tiene en el país, sobre la identidad taxonómica de los virus asociados a su ocurrencia es precario y por tanto, se carece de buena parte de la información necesaria para el diseño de estrategias de manejo efectivas contra esta enfermedad. En este trabajo se evaluó la presencia e incidencia de los virus isométricos AMV, CMV y PLRV en cultivos de tomate de árbol establecidos en el departamento de Antioquia, mediante el empleo de pruebas de ELISA, RT-PCR y secuenciación de la cápside viral. Las pruebas serológicas permitieron detectar la presencia de los tres virus, aunque las secuencias generadas sólo fueron confirmatorias para el virus PLRV, lo que posiblemente sugiere que existen diferencias en las secuencias dirigidas a los sitios de alineamiento de los cebadores para AMV y CMV. La incidencia de los virus CMV y PLRV en las muestras analizadas fue de un 57 y 41% respectivamente, mientras que para AMV ésta solo llegó a un nivel del 2%. Los hallazgos obtenidos permiten confirmar la presencia de un complejo viral asociado a la enfermedad de la Virosis del tomate de árbol en el territorio mencionado.

Tamarillo is one of the main fruit crops in the Colombian andean region. However, during the past years, there has been a drastic reduction in the total crop area due to the detrimental effect of a disease known as Virosis. In spite of the economic impact of this disease, there is little knowledge about the taxonomical identity of its associated viruses; therefore, no information is available for the design of appropriate control strategies. In this work, was evaluated the presence and incidence levels of AMV, CMV and PLRV viruses in tamarillo crops in the department of Antioquia by ELISA, RT-PCR and DNA sequencing of the viral capsid. Even though serological tests detected the presence of all three viruses, DNA sequencing could only confirm the presence of PRLV. The failure to detect AMV and CMV at the DNA level suggests differences in the target sequences used for primer design. CMV and PLRV were detected in 57 and 41% of all the analysed samples in contrast to AMV whose incidence level was only 2%. These findings confirm the presence of viral complex associated to the Virosis disease of tamarillo orchards in the mentioned territory.

Spongospora subterranea (Wallroth) Lagerheim f. sp. subterranea Tomlinson, agente causal de la sarna polvosa de la papa, es un parásito obligado el cual por sus características biológicas y reproductivas, posee una gran capacidad de sobrevivencia e infección no solo en su principal hospedero, sino también en diversas especies silvestres. El objetivo de este estudio fue realizar observaciones de estructuras celulares asociadas a S. subterranea f. sp. subterranea en plantas de papa en diferentes estados fenológicos naturalmente infectadas por el patógeno, sintomáticas o asintomáticas. Para este propósito se realizaron observaciones al microscopio de luz haciendo tinción de estos tejidos con azul de tripano, mediante lo cual fue posible identificar todas las fases de S. subterranea en las plantas analizadas. Lo anterior demuestra que en los tejidos radicales de papa, no siempre la presencia de agallas es indicativo de la infección, aun plantas asintomáticas pueden ser portadores de estructuras del protozoo; además, algunas estructuras asociadas a S. subterranea como plasmodios o células únicas, son de ocurrencia común y coinciden con las mencionadas frecuentemente en la literatura también en hospederos silvestres, lo que lleva a proponer la hipótesis de que este es un microorganismo común en suelos, que causa disturbios importantes puntualmente en cultivos de papa y cuyas estrategias de control deben orientarse el conocimiento de la ecología de las interacciones del protozoo, sus hospederos y el suelo.

Spongospora subterranea (Wallroth) Lagerheim f. sp. subterranea Tomlinson, is the causal agent of powdery scab in potato and is an obligate parasite, because the biological and reproductive characteristic, it has a great survival and infection capacity in both, natural and wilds host which, can belong in different ecosystems and climatic conditions. The goal in this study was to make observations of cellular associate structures to S. subterranea f. sp. subterranea in potato plants in different phenologycal stages naturally infected by the pathogen, with root galls or symptomless. For this proposal were carried out observations at light microscopy, means by were identified all phases of S. subterranea in all symptomless plants. It was demostrated that in radicular tissues of potato not always galls are indicative of infection, plants without symptoms can have protozoa structures, beside associated structures to S. subterranea as plasmodium an sporangium aggregate, are commonly found and coincident with some structures frequently reporter in wild hosts; this appreciations, allows to propose that this microorganism is common in soils, associated with wild and cultivate species, causing important disturbs specially on potato plants, where control strategies should be oriented towards the knowledge of ecology of interactions protozoa, its host and soil.

Spongospora subterranea (Wallroth) Lagerheim f. sp. subterranea Tomlinson es el agente causal de la sarna polvosa de la papa. Este patógeno es un protozoario, su infección ocurre por medio de zoosporas las cuales se liberan a partir de quistosoros y son el principal modo de dispersión de la enfermedad. Estos pueden encontrarse en tubérculos, raíces y el suelo, donde permanecen como estructuras de resistencia por varios años, hasta cuando las condiciones ambientales favorecen la liberación de zoosporas, para dar inicio a nuevas infecciones. En este trabajo, se evaluó el efecto de los exudados de raíz de papa, temperatura y fuente de inóculo con quistosoros aislados de suelo, raíz y tubérculo con el objetivo de verificar las condiciones en las cuales ocurre la liberación de zoosporas. Para tal fin se realizaron dos experimentos, en el primero se evaluó el efecto del agua y extracto de raíces y en el segundo el extracto de raíces y las diferentes fuentes de inóculo. Las evaluaciones se hicieron por conteo de zoosporas móviles durante 120 horas cada 24 horas. Se observó que el exudado de raíz tiene una alta influencia en la liberación de zoosporas, la cual ocurre entre los 15 y 23 °C a partir de las 48 y hasta las 96 horas, no se detectaron diferencias entre las fuentes de inóculo, lo que indica que independiente de su origen, si existen las condiciones ambientales adecuadas los quistosoros, tienen la capacidad de liberar un número suficiente de zoosporas que potencialmente pueden iniciar el proceso de infección en el hospedero.

Spongospora subterranea (Wallroth) Lagerheim f. sp. subterranea Tomlinson is the causal agent of potato powdery scab. This pathogen is worldwide distributed on the potato fields, infections occurs by zoospores which are inside resting spores called sporeballs or cystosori which are the principal way of disease spread. Sporeballs can be found on tubers, roots and soil as resistance structure, that can survive during many years until the weather conditions favor the zoospore release in order to start new infections on potato and wild host species. In this research was evaluated the temperature, cystosori inoculum source from tuber, potato roots and soil, and the effect of potato roots exudates in order to verify the conditions where the zoospore release occurs. Thus, two assays were carried out; in the first assay, the effect of water and potato root exudates were evaluated and in the second assay, was performed on potato root exudates at different inoculum sources. Mobile zoospores were counted in a Neubauer chamber during 120 hours at 24 h intervals. Both experiments showed that root exudates had a high influence in the zoospore release, the best releases were obtained between 15 and 23 °C from 48 to 96 hours. There was not difference among the inoculum sources, it means that any sporeball, if the weather conditions have been adequate, has the capacity to produce sufficient number of zoospores to start the infection process inside the host.

A Clorose Variegada dos Citros (CVC), causada pela bactéria Xylella fastidiosa, é uma séria ameaça à citricultura brasileira, constituindo-se, atualmente, numa das principais doenças dos citros no Brasil. O objetivo desse trabalho foi avaliar cultivares de citros introduzidas quanto à suscetibilidade ou resistência à CVC, em condições de campo. O trabalho foi conduzido em Bebedouro-SP. Os materiais genéticos estudados foram cultivares de tangerinas e híbridos (tangores e tangelos) introduzidas de bancos de germoplasma da Itália, Portugal, Espanha e Córsega. O trabalho foi constituído por 56 parcelas, com três plantas das quais uma foi inoculada, empregando-se o método de encostia, utilizando-se de mudas previamente infectadas como fontes da bactéria. Foram avaliados os sintomas da doença mediante observação visual através de notas e teste de PCR, específico para Xylella fastidiosa. Os materiais genéticos que se apresentaram positivos ao PCR, mas não apresentaram sintomas, e os que foram negativos ao PCR, possuem um potencial de utilização em programas de melhoramento genético visando à resistência e/ou à tolerância à doença.

The Citrus Variegated Chlorosis (CVC), caused by the bacteria Xylella fastidiosa, is a serious threat to the Brazilian citriculture, being, actually, one of the mains diseases to the citrus in Brazil. The objective of this work was evaluate citrus cultivars, introduced according to the susceptibility or resistance to CVC, in field conditions. The research was carried in Bebedouro city - São Paulo state - Brazil. The genotypes studied were cultivars of mandarines and hybrids (tangors and tangelos), introduced from the germplasm collections of Italy, Portugal, Spain and Corsica. The work was composed by 56 portions, with 3 plants, being one of them inoculated, using the approach graft method, with infected plants. Were evaluated the symptoms of the disease by visual observation and PCR test, specific to Xylella fastidiosa. The genotypes that had positive results to the PCR test, but did not presented symptoms, and the ones that were negative to the PCR, have great possibilities to be used in genetic improvement programs, aiming resistance and/or tolerance to the disease.

A Clorose Variegada dos Citros (CVC), causada pela bactéria Xylella fastidiosa, é atualmente uma das doenças que mais afeta a citricultura brasileira, sendo as variedades de laranja-doce as mais afetadas. Ensaio instalado na Estação Experimental de Bebedouro (EECB), em condições de estufa, teve como objetivo avaliar o comportamento em relação à CVC de germoplasma de citros introduzidos pela EECB, Fundecitrus e Cenargen. Os materiais foram multiplicados sobre diversos porta-enxertos e, quando atingiram o tamanho adequado, inoculados por garfagem lateral de ramo doente. Cada variedade constou de quatro plantas, três das quais foram inoculadas, e a outra sem inocular deixada como padrão. As avaliações consistiram na observação de sintomas, teste de ELISA e PCR. Os primeiros sintomas nos materiais contaminados começaram a surgir 7 meses após a inoculação. Encontraram-se 18 variedades positivas no teste de PCR, o que indica sua suscetibilidade à bactéria Xylella fastidiosa. Entretanto, as variedades que foram detectadas pelo teste ELISA e não pelo PCR não foram contadas como suscetíveis e, sim, como falsos positivos.

The Citrus Variegated Chlorosis (CVC), caused by the Xylella fastidiosa bacteria is one of the most important diseases that affect the Brazilian citriculture, been the sweet orange the most susceptible to the bacteria. The objective of this experiment, carried out in the Bebedouro Experimental Station (EECB) in greenhouse conditions, was the evaluation of the behavior of citrus germplasm introduced by the EECB, Fundecitrus and Cenargen, in relation to the CVC. The plants were multiplicated over several rootstocks and when they achieved the right size were inoculated by grafting of diseased stem. Each material had four plants, three of them were inoculated and the other one wasn't inoculated, leaving like control. The plants were evaluated by symptoms presence, ELISA and PCR tests. The first symptoms in the contaminated materials appeared 7 months after inoculation. Eighteen materials were found positives in the PCR test, showing that this materials are susceptible to the Xylella fastidiosa. Howoever, the materials where the bacteria was reported by the ELISA, but not by the PCR test, were grouped like false positives and weren't were accepted like susceptible.